окраска микроорганизмов

ОКРАСКА МИКРООРГАНИЗМОВ, метод бактериол. исследования, применяемый для обнаружения и изучения микробов при микроскопировании препаратов. Последние могут быть приготовлены из культур микробов или нативного материала — тканей органов, крови, мокроты, мочи, фекалий, гноя, молока и других (см. бактериологическое исследование).

О. м. — сложный физико-химич. процесс, при к-ром существенную роль играют рН среды, адсорбция, капиллярные явления, электрич. заряд и химич. состав красителя и окрашиваемых объектов. Эти факторы определяют взаимодействие отдельных структур микробной клетки с тем или иным красителем. На результаты О. м. оказывают влияние физиол. состояние микробов, способ приготовления препарата и метод окраски. Для О. м. применяют анилиновые красители, большая часть которых — соли кислот или оснований, поэтому эти красители, в свою очередь, подразделяются на основные и кислые. Для О. м. применяют гл. обр. основные красители, т. к. они быстрее фиксируются микробной клеткой. Кислые красители используют преим. для окрашивания фона препарата в контрастный цвет. Существуют также нейтральные красители (краска Романовского — Гимзы). В микробиол. практике наиболее употребительны анилиновые красители: красные — основной фуксин, сафранин, нейтральный красный, Конго красный; синие — метиленовый синий, толуидиновый синий, опаловый синий; фиолетовые — метил фиолетовый, кристаллич. фиолетовый, генциан фиолетовый, фиолетовый Гофмана; зелёный — малахитовый зелёный, бриллиантовый зелёный; жёлто-коричневые — везувин, хризоидин. Из красителей готовят водные или спиртово-водные растворы. Для улучшения красящей способности некоторых красителей к растворам добавляют фенол, едкий калий, буру и др. Приготовление рабочих растворов проводят по определённым прописям.

Окраску производят как живых (витальная окраска), так и убитых микробов, фиксированных на предметном стекле. Для витальной О. м. готовят препараты раздавленной или висячей капли; краситель разводят в физиол. растворе хлорида натрия (1:10000—1:100000). Живые микроорганизмы окрашиваются плохо, поэтому наиболее распространена окраска убитых микробов. О. м. проводят простым и сложным методами. При простом методе применяют к.-л. один краситель в рабочем растворе, которым окрашивают препарат в течение 1—2 мин; затем краску смывают дистил. водой и высушивают препарат фильтровальной бумагой. Микробы окрашиваются в цвет используемого красителя. При сложном методе используют 2 красителя (основной и дополнительный) и различные реактивы. Этот метод позволяет отличить одну группу микробов от другой, выявить отдельные элементы микробной клетки (споры) или химич. вещества цитоплазмы (зёрна волютина, нуклеотиды). К сложным методам О. м. относят: окраску по Грану, окраску кислотоустойчивых микробов (методы Циля — Нельсена и др.), спор микробов (методы Ожешко, Пешкова, Мюллера и др.), зёрен волютина (методы Нейссера, Мейера), нуклеотидов (метод Фейльгена) и др. Во всех этих позитивных методах красители действуют непосредственно на микробную клетку. Существуют и негативные методы О. м., основанные на окрашивания фона препарата, на к-ром контрастно видны непрокрашенные микробы. Эти методы применяют в тех случаях, когда изучаемые микроорганизмы (напр., спирохеты) или отдельные элементы микробной клетки (напр., капсула) плохо окрашиваются. В некоторых случаях используют комбинированные методы О. м., включающие позитивный и негативный способы окраски (метод Гинса для обнаружения капсул). Широкое распространение получили флюоресцентные красители, соединённые с сывороткой, содержащей антитела против микроба определённого вида, благодаря чему при люминесцентной микроскопии происходит свечение этих микробных клеток.

• см. также микроскопия

^{Лит.: Розанов Н. И., Микробиологическая диагностика заболеваний с.-х. животных, М., 1952; Роуз Э., Химическая микробиология, [пер. с англ.], М., 1971.}