хроматография

ХРОМАТОГРАФИЯ (от греч, chroma, род. надеж chromatos — краска, цвет и grapho — пишу), физико-химия, метод разделения смесей, близких по составу и свойствам, основанный на распределении их компонентов между двумя фазами — неподвижной и подвижной, протекающей через неподвижную. При X. вещества берутся в малых количествах (десятые доли миллиграмма), не подвергаются в процессе анализа химич. изменениям. В биол. исследованиях X. применяют, напр., для выделения из сложных смесей белков, в т. ч. ферментов, витаминов, гормонов и др. биологически активных веществ, канцерогенных веществ, пигментов; в фармацевтич. промышленности — для получения чистых препаратов.

В зависимости от механизма разделения различают след. виды X.: адсорбционную, распределительную, ионообменную, осадочную, окислительно-восстановительную, адсорбциошю-комплексообразоватсльную, аффинную. Адсорбционная X. основана на избирательной адсорбции отдельных компонентов смеси при её пропускании через колонку, заполненную соответств. адсорбентом (окись алюминия, силикагель, крахмал и Др.). Распределительная X. основана на различном распределении компонентов смеси между двумя несмешивающимися жидкостями, одна из которых (неподвижная) находится в порах твёрдого носителя, а вторую (подвижную) пропускают через колонку с носителем. С помощью этого вида X. разделяют жирные к ты содержимого рубца. В основе ионообменной X. лежат обменные процессы между подвижными ионами адсорбента (ионита) и ионами (катионами и анионами) электролита, содержащимися в анализируемом растворе. Этот вид X. используют для определения связанного с белками кальция в сыворотке крови, выделения мн. ферментов и др. белков. Осадочная X. основана на различной растворимости осадков, образуемых компонентам и смеси со спец. реактивами, нанесёнными на высокодисперсное вещество. В окислительно-восстановительной X. разделение вещества обусловлено различными скоростями реакций, протекающих между окислителем или восстановителем, содержащихся в колонке, и ионами анализируемого раствора. При адсорбционно-комплексообразовательной X. используют носитель, способный удерживать как комплексообразующий агент, так и продукты его реакции с катионами металла анализируемой смеси. В аффинной Х. компоненты анализируемой смеси разделяются и зависимости от их биол. специфичности к носителю. С учетом сред, в которых проводят разделение, различают газовую, газово-жидкостную и жидкостную X.; по форме проведения процесса — колоночную, бумажную и тонкослойную. Разновидность X. — гель-хроматография (гель-фильтрация), при которой анализируемые смеси пропускают через сефадексы (производные декстрана). Скорость прохождения веществ через них зависит от мол. м. вещества (первыми проходят вещества с большей мол. м.). Разделение белков плазмы крови с помощью этого метода применяют в клинич. практике.

^{Лит.: Кармолиев Р. X., Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии, М., 1971.}